Comparación del efecto citotóxico de tres agentes quelantes sobre fibroblasto del ligamento periodontal humano. Estudio in vitro
Resumen
Objetivo: Comparar in vitro el efecto citotóxico de tres agentes quelantes sobre fibroblas- tos del ligamento periodontal humano.
Materiales y métodos: Se utilizaron cultivos de fibroblastos de ligamento periodontal humano, los cuales fueron colocados en contacto con los agentes quelantes a evaluar (RC- Prep, Glyde, EDTA al 17%) a intervalos de 15, 30 y 60 minutos. Se midió la absorbancia para cada uno de los grupos, para determinar el grado de actividad enzimática, que es indicador de muerte celular. Previo a la cuantificación de la absorbancia se corroboró mi- croscópicamente la formación de los cristales de formazán, los cuales se forman alrededor de los fibroblastos, y su presencia es indicador de integridad de la membrana y de la activi- dad metabólica. Por microscopia se verificó la formación de cristales de formazan, después de agregar azul de tripán.
Resultados: El Glyde mostró mayor grado de citotoxicidad, con una diferencia estadís- ticamente significativa, al compararlo con EDTA 17% y el RC-PREP. El EDTA presentó mayor citotoxicidad que el RC-PREP a los 15minutos, evento que cambió a los 30 y 60 minutos.
Conclusiones: Los agentes quelantes RC-Prep, Glyde y EDTA tienen un efecto citotóxico a nivel de los fibroblastos del ligamento periodontal, siendo el EDTA el de menor efecto citotóxico a los 30 y 60 minutos comparado con RC-Prep y Glyde
Palabras clave: Agentes quelantes, fibroblastos, citotoxicidad, ligamento perio- dontal, MTT.
Abstract
Objectives: To compare in vitro, the cytotoxic effect of three chelating agents on human periodontal ligament fibroblasts, RC-Prep, Glyde and EDTA.
Methods: Fibroblast cultures of human periodontal ligament were used, which are placed in contact with chelating agents to evaluate (RC-Prep, Glyde, 17% EDTA) at time inter- vals of 15,30 and 60 minutes. Absorbance was measured for each group to determine the degree of enzyme activity, which is an indicator of cell death. Prior to the measurement of absorbance was confirmed microscopically, the formation of formazan crystals, which are formed around fibroblasts, and its presence is an indicator of membrane integrity and metabolic activity. Microscopy verified the formation of formazan crystals, after adding trypan blue.
Results: Glyde showed greater cytotoxicity with a statistically significant difference when compared with 17% EDTA and RC-PREPchelants. The EDTA showed higher cytotoxicity than the RC-PREP to 15min, and that event changed at 30 and 60 minutes.
Conclusion: It was shown experimentally that the chelating agents RC-Prep, EDTA and Glyde have a cytotoxic effect at the periodontal ligament fibroblasts. EDTA has a lowest cytotoxic effect at 30 and 60 minutes compared to RC-Prep and Glyde.
Keywords: Chelating agents, fibroblasts, cytotoxicity, periodontal ligament, MTT.
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